大腸桿菌測(cè)定儀：大腸桿菌檢測(cè)新技術(shù)。隨著人們生活水平的提高，食品安全越來(lái)越受到重視。在不斷報(bào)道的食品安全事件中，大腸桿菌是引發(fā)這些事件的主要影響因素之一，也是判斷食品污染程度的重要參數(shù)。因此，使用快速、可靠、簡(jiǎn)單的方法準(zhǔn)確檢測(cè)食品中大腸桿菌的數(shù)量是否超標(biāo)非常重要。

大腸桿菌檢測(cè)新技術(shù)

氣相色譜和高效液相色譜

氣相色譜主要是對(duì)大腸桿菌進(jìn)行一系列衍生化預(yù)處理后，為后面的分析研究提供盡可能多的化學(xué)成分。大腸桿菌的污染程度可以通過(guò)頂空氣相色譜法來(lái)分析，其原理是利用食品密封系統(tǒng)頂部的微生物代謝產(chǎn)物CO2來(lái)分析微生物。該方法對(duì)食品質(zhì)量安全檢測(cè)具有重要意義。與上述傳統(tǒng)技術(shù)相比，該方法具有檢測(cè)速度快、靈敏度高的優(yōu)點(diǎn)。高效液相色譜(HPLC)主要根據(jù)離子對(duì)反相色譜的原理分析核酸。高效液相色譜法主要針對(duì)DN片段的分離。長(zhǎng)鏈DN攜帶更多的磷酸基團(tuán)，因此更多的TE會(huì)與之融合，其在柱中的停留時(shí)間會(huì)增加。因?yàn)橐译媸怯H水性的，DN可以被它分離，在一定的變性溫度下，光譜可以顯示出明顯的吸收峰。該技術(shù)具有精度高、靈敏度高、成本低的優(yōu)點(diǎn)，可以大大提高工作效率。

三磷酸腺苷生物發(fā)光技術(shù)

三磷酸腺苷生物發(fā)光技術(shù)是近年來(lái)發(fā)展迅速的一種微生物快速檢測(cè)方法。TP是活細(xì)胞中常見(jiàn)的能量代謝產(chǎn)物，為細(xì)胞提供各種生理活動(dòng)所需的能量，其在生物體內(nèi)的含量維持在一定范圍內(nèi)。檢測(cè)TP含量的一種方法是熒光分光光度法，生物發(fā)光是熒光素酶催化活細(xì)胞的熒光。目前熒光素酶主要來(lái)自北美的螢火蟲(chóng)，相對(duì)分子量為6.2萬(wàn)。它能催化熒光素的氧化反應(yīng)。該反應(yīng)的終產(chǎn)物不穩(wěn)定，并迅速分解產(chǎn)生熒光。與傳統(tǒng)的檢測(cè)方法相比，不同之處在于檢測(cè)結(jié)果可以在幾分鐘內(nèi)獲得，熒光光度計(jì)便攜、使用方便，適合現(xiàn)場(chǎng)檢測(cè)。這項(xiàng)技術(shù)可用于檢測(cè)微小污染物的水平以及食品加工設(shè)備及其表面的清潔度。

聚合酶鏈反應(yīng)檢測(cè)技術(shù)

PCR(聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng))早由Kleppe等人于1971年提出，并于1985年被確認(rèn)為一種檢測(cè)方法。PCR檢測(cè)技術(shù)是一種聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)，采用變性-退火-延伸三個(gè)步驟，使DN基因在體外實(shí)現(xiàn)解鏈和解鏈，類(lèi)似于體外增加和復(fù)制的一種形式。理論上，一個(gè)DN分子在2小時(shí)內(nèi)可以擴(kuò)增到106 ~ 109倍，用瓊脂糖凝膠電泳檢測(cè)PCR擴(kuò)增產(chǎn)物的熒光帶。

目前，聚合酶鏈反應(yīng)技術(shù)廣泛應(yīng)用于生命科學(xué)的許多學(xué)科。在食品微生物檢測(cè)領(lǐng)域，聚合酶鏈反應(yīng)可以快速檢測(cè)食品中的微生物含量。常用的有免疫聚合酶鏈反應(yīng)、實(shí)時(shí)熒光定量聚合酶鏈反應(yīng)、多重聚合酶鏈反應(yīng)、逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)和實(shí)時(shí)定量聚合酶鏈反應(yīng)。史云等人建立了一種檢測(cè)肉類(lèi)和肉制品中大腸桿菌的雙重聚合酶鏈反應(yīng)方法，但該方法需要較長(zhǎng)的樣品純化時(shí)間，對(duì)操作人員的專(zhuān)業(yè)知識(shí)要求較高。

生物傳感器檢測(cè)技術(shù)

生物傳感器是基于生物化學(xué)傳感技術(shù)，以抗體、酶、細(xì)胞等為識(shí)別元件，結(jié)合信號(hào)轉(zhuǎn)換器和電子測(cè)量?jī)x器的分析工具。目前成熟的商用傳感器包括免疫傳感器、酶?jìng)鞲衅鳌N雜交傳感器、微生物傳感器、分子印跡傳感器等。生物傳感器具有靈敏度高、選擇性高、穩(wěn)定性好、成本低等優(yōu)點(diǎn)，可以在復(fù)雜系統(tǒng)中快速在線(xiàn)監(jiān)測(cè)。目前，用于信號(hào)傳輸?shù)姆椒ò暠砻娌▊鬏敗㈦娀瘜W(xué)方法和光傳輸方法。免疫傳感器和基因傳感器主要用于食品微生物檢測(cè)。原理是利用DN雜交和抗原抗體反應(yīng)進(jìn)行檢測(cè)，然后轉(zhuǎn)換成光信號(hào)或電信號(hào)，由儀器放大輸出。生物傳感器分子識(shí)別元件的載體可以由各種材料制成，大多數(shù)是光纖和熒光光度計(jì)。殷涌光等人利用抗體免疫吸附反應(yīng)，利用一級(jí)抗體——抗原和二級(jí)抗體的夾心法，大大增加了膠體金復(fù)合抗體作為二級(jí)抗體的質(zhì)量，延長(zhǎng)了膠體金復(fù)合抗體與微生物的結(jié)合過(guò)程，放大并穩(wěn)定了信號(hào)，從而顯著提高了檢測(cè)的準(zhǔn)確性。

免疫磁珠技術(shù)

免疫磁珠技術(shù)是一種大腸桿菌的分離技術(shù)。原理是利用磁珠作為抗體載體，將磁珠與大腸桿菌結(jié)合，通過(guò)磁力實(shí)現(xiàn)機(jī)械運(yùn)動(dòng)來(lái)分離大腸桿菌。與其他細(xì)菌分離方法相比，免疫磁珠技術(shù)大大提高了樣品中致病性副溶血弧菌的檢測(cè)效率。免疫磁珠技術(shù)可以快速處理不同菌株樣品中的不同微生物，這種方法可以大大提高檢測(cè)效率。